01 细胞转染概述及应用

细胞转染是将外源基因（如DNA、RNA等）通过多种化学、物理或生物学方法导入真核细胞的一项技术，是生物医学研究中的重要工具，广泛应用于以下几个领域：

• 研究基因功能：通过导入特定基因进行过表达研究，探讨其在细胞功能中的影响；或利用siRNA或shRNA降低基因表达，以研究基因缺失对细胞功能的影响。
• 蛋白质表达与生产：转染编码特定蛋白的基因以进行蛋白质表达和纯化，或者通过融合荧光蛋白研究其在细胞内的定位及分布。
• 细胞工程：通过转染和筛选，建立能够稳定表达外源基因的细胞系，构建稳转细胞株。
• 药物筛选与毒性测试：转染特定基因以验证药物靶点的有效性，并通过高通量筛选挖掘潜在药物。
• 基因治疗：通过导入或修复基因治疗遗传病，或转染编码抗原的基因以进行疫苗研发。

02 细胞转染分类

Part1 按导入核酸在宿主细胞内存在时间的长短，细胞转染分为瞬转和稳转。

瞬转：外源基因得以表达，但不会整合入宿主细胞基因组，随细胞分裂逐渐丢失。

稳转：外源基因能够整合入细胞基因组，随着细胞分裂持续表达，使转染细胞的后代同样表达外源基因。

二者的主要区别在于用途、稳定性、方法及筛选过程：

• 用途：瞬转用于短时间内获得高水平基因表达，而稳转旨在获得稳定表达目的基因的细胞株。
• 稳定性：瞬时转染稳定性较差，稳转则由于基因整合在染色体中，有良好稳定性。
• 方法：瞬转一般采用脂质体转染法，而稳转则更倾向于使用病毒转染或电转等方法。
• 筛选过程：瞬转后一般不需要筛选，而稳转则需通过筛选以挑选出目的基因成功整合的细胞。

Part2 按照方法可以分为物理介导法、化学介导法和生物介导法。

物理介导法：通过物理手段（如电穿孔法、显微注射法）直接导入外源核酸，效率高但对细胞损伤大，细胞存活率低。

化学介导法：使用PEI、脂质体等化学物质改变细胞膜性质以实现基因转移，此方法操作简单、周期短，但大多不能长期稳定表达外源基因。

生物介导法：通常利用病毒作为载体将外源基因导入细胞，如慢病毒、腺病毒等，此法可实现外源基因的长期稳定表达，但操作相对复杂，周期较长。

综上所述，细胞转染方法多种多样，选择适合的方法需考虑实验需求、实验室条件及细胞类型等因素。目前，很多实验室主要采用化学介导的脂质体转染和生物介导的慢病毒转染方法。虽然质粒转染操作简单，但在某些细胞系中转染效率较低，给实验带来麻烦。相比之下，病毒转染的稳定性更好，对于非分裂的原代细胞和干细胞等类型具有较高的转染效率，同时适用于体内外实验，如动物成瘤研究等。

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✔ 慢病毒转染服务

• 服务编号 SNTS-L001: GFP稳转，获得GFP稳定表达的细胞，周期3-4周。
• 服务编号 SNTS-L002: RFP稳转，获得RFP稳定表达的细胞，周期3-4周。
• 服务编号 SNTS-L003: mCherry稳转，获得mCherry稳定表达的细胞，周期3-4周。
• 服务编号 SNTS-L004: LUC稳转，获得LUC稳定表达的细胞，周期3-4周。
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