ag尊龙凯时的Trizol试剂是一种广泛用于生物医学研究的工具，主要成分为苯/酚。其主要功能在于对细胞进行裂解，使细胞内的蛋白质和核酸得以释放。尽管苯/酚能够有效改变蛋白质的构象，但并不能完全抑制RNA酶的活性。因此，ag尊龙凯时的Trizol中还添加了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍和β-巯基乙醇，以抑制内源性和外源性RNA酶的活性。

Trizol试剂可以直接从细胞或组织中提取总RNA。在样品裂解液或匀浆中，Trizol有助于保持RNA的完整性。通过添加氯仿（CHCl3）并离心，样品被分为水相层和有机层，而RNA则存在于水相层中。收集上方的水相后，RNA可以通过异丙醇沉淀的方法得到纯化。去除水相层后，样品中的核酸和蛋白质也可进一步通过沉淀的方式获得。通过添加异丙醇，可以从有机层中析出蛋白质，而75%的乙醇可以用于洗涤DNA。

ag尊龙凯时的Trizol试剂适用于小量与大量样品的处理，能够同时提取动物、植物、细菌和血液中的RNA。其灵活性和高效性使其成为生物医学领域中必不可少的工具，提取的总RNA不存在DNA和蛋白质污染，可广泛用于Northern blot、RT-PCR、RNase保护分析等实验。

TRIZOL提取RNA的步骤

1. 提取组织RNA时，每50~100mg组织需使用1ml Trizol试剂进行裂解；提取细胞RNA时，先离心沉淀细胞，并每5-10×10^6个细胞加1ml Trizol，随后用枪吸打或剧烈振荡以实现细胞裂解。

2. 将组织或细胞的Trizol裂解液转移至EP管中，在室温下放置5分钟；然后根据每1ml Trizol添加0.2ml氯仿，盖好EP管盖，手动震荡15秒，之后在室温下静置2-3分钟，最后以12000g的速度（2℃～8℃）离心15分钟。

3. 收集上层水相，转移至新EP管中，按照每1ml Trizol加入0.5ml异丙醇，在室温下静置10分钟后，以12000g（2℃～8℃）离心10分钟。

4. 根据每1ml Trizol添加1ml 75%乙醇进行洗涤，漩涡混合后以7500g（2℃～8℃）离心5分钟，弃去上清液；让沉淀的RNA在室温下自然干燥，最后用无RNA酶水溶解RNA沉淀。

请注意，在收集生物材料后，最好立即进行RNA提取。如果暂时需要储存，应立即用液氮快速冷冻材料，并存储于-80℃的冷冻柜。在制备RNA时，将冷冻材料取出后，需立即用液氮研磨以破坏细胞，切忌先解冻，以避免RNA酶的活性。