第一章：实时荧光定量PCR概述

一、实时荧光定量PCR的概念

实时荧光定量PCR（Real-time PCR）是一种利用荧光信号实时监测PCR反应全过程的方法。通过积累荧光信号，最终基于CT值（阈值循环数）和标准曲线，对未知模板进行定量分析。

二、实时荧光定量PCR的原理

A. 化学原理：该方法通过将产物DNA分子转化为荧光信号，荧光值的测定直接反映了产物DNA的数量。

B. 数学原理：利用循环次数“n”（CT值）来计算起始DNA的数量。

三、实时荧光定量PCR方法的选择

在选择合适的实时荧光定量PCR方法时，需要考虑样本的类型、检测灵敏度及实验目的等多方面因素，以确保获得最佳的实验结果。

四、实时荧光定量PCR的优势

实时荧光定量PCR提供了一种有效的方法来比较不同样本间特定基因的表达水平，其主要优点包括：

• 能够实时监控PCR反应进展；
• 具备更广泛的检测范围，精准定量样本中的起始DNA量；
• 在单个反应管中同时完成扩增与检测，省去PCR后的处理步骤。

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